光學(xué)顯微鏡的使用步驟和維護(hù)保養(yǎng)
一、操作步驟和注意事項(xiàng)
（一）正置顯微鏡
1、安放右手握住鏡臂，左手托住鏡座，使鏡體保持直立。桌面要清潔、平穩(wěn)，要選擇臨窗或光線充足的地方。單筒的一般放在左側(cè)，距離桌邊3～4厘米處。
2、清潔檢查顯微鏡是否有毛病，是否清潔，鏡身機(jī)械部分可用干凈軟布擦拭。透鏡要用擦鏡紙擦拭，如有膠或粘污，可用少量二甲苯清潔之。
3、對(duì)光鏡筒升至距載物臺(tái)1～2厘米處，低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔。調(diào)節(jié)光圈和反光鏡，光線強(qiáng)時(shí)用平面鏡，光線弱時(shí)用凹面鏡，反光鏡要用雙手轉(zhuǎn)動(dòng)。若使用的為帶有光源的顯微鏡，可省去次步驟，但需要調(diào)節(jié)光亮度的旋鈕。
4、安裝標(biāo)本將玻片放在載物臺(tái)上，注意有蓋玻片的一面一定朝上。用彈簧夾將玻片固定，轉(zhuǎn)動(dòng)平臺(tái)移動(dòng)器的旋鈕，使要觀察的材料對(duì)準(zhǔn)通光孔中央。
5、調(diào)焦調(diào)焦時(shí)，先旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦旋鈕慢慢降低鏡筒，并從側(cè)面仔細(xì)觀察，直到物鏡貼近玻片標(biāo)本，然后左眼自目鏡觀察，左手旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標(biāo)本物像時(shí)停止，再用細(xì)調(diào)焦旋鈕回調(diào)清晰。操作注意：不應(yīng)在高倍鏡下直接調(diào)焦；鏡筒下降時(shí)，應(yīng)從側(cè)面觀察鏡筒和標(biāo)本間的間距；要了解物距的臨界值。若使用雙筒顯微鏡，如觀察者雙眼視度有差異，可靠視度調(diào)節(jié)圈調(diào)節(jié)。另外雙筒可相對(duì)平移以適應(yīng)操作者兩眼間距。
6、觀察若使用單筒顯微鏡，兩眼自然張開，左眼觀察標(biāo)本，右眼觀察記錄及繪圖，同時(shí)左手調(diào)節(jié)焦距，使物象清晰并移動(dòng)標(biāo)本視野。右手記錄、繪圖。鏡檢時(shí)應(yīng)將標(biāo)本按一定方向移動(dòng)視野，直至整個(gè)標(biāo)本觀察完畢，以便不漏檢，不重復(fù)。光強(qiáng)的調(diào)節(jié)：一般情況下，染色標(biāo)本光線宜強(qiáng)，無色或未染色標(biāo)本光線宜弱；低倍鏡觀察光線宜弱，高倍鏡觀察光線宜強(qiáng)。除調(diào)節(jié)反光鏡或光源燈以外，虹彩光圈的調(diào)節(jié)也十分重要。
（1）低倍鏡觀察觀察任何標(biāo)本時(shí)，都必須先使用低倍鏡，因?yàn)槠湟曇按?，易發(fā)現(xiàn)目標(biāo)和確定要觀察的部位。
（2）高倍鏡觀察從低倍鏡轉(zhuǎn)至高倍時(shí)，只需略微調(diào)動(dòng)細(xì)調(diào)焦旋鈕，即可使物像清晰。使用高倍鏡時(shí)切勿使用粗調(diào)焦旋鈕，否則易壓碎蓋玻片并損傷鏡頭。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器時(shí)，不可用手指直接推轉(zhuǎn)物鏡，這樣容易使物鏡的光軸發(fā)生偏斜，轉(zhuǎn)換器螺紋受力不均勻而破壞，Z后導(dǎo)致轉(zhuǎn)換器就會(huì)報(bào)廢。（3）油鏡的觀察先用低倍鏡及高倍鏡將被檢物體移至視野中央后，再換油鏡觀察。油鏡觀察前，應(yīng)將顯微鏡亮度調(diào)整至Z亮，光圈*打開。使用油鏡時(shí)，先在蓋玻片上滴加一滴香柏油（鏡油），然后降低鏡筒并從側(cè)面仔細(xì)觀察，直到油鏡浸入香柏油并貼近玻片標(biāo)本，然后用目鏡觀察，并用細(xì)調(diào)焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標(biāo)本的焦段時(shí)停止并調(diào)節(jié)清晰。香柏油滴加要適量。油鏡使用完畢后一定要用擦鏡紙沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦鏡紙擦去多余二甲苯。
7、結(jié)束操作觀察完畢，移去樣品，扭轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器，使鏡頭V字型偏于兩旁，反光鏡要豎立，降下鏡筒，擦抹干凈，并套上鏡套。若使用的是帶有光源的顯微鏡，需要調(diào)節(jié)亮度旋鈕將光亮度調(diào)至Z暗，再關(guān)閉電源按鈕，以防止下次開機(jī)時(shí)瞬間過強(qiáng)電流燒壞光源燈。
（二）倒置顯微鏡倒置顯微鏡與正置顯微鏡的主要區(qū)別在于物鏡位于載物臺(tái)下方，這樣有利于觀察時(shí)在上方對(duì)樣品進(jìn)行一些實(shí)時(shí)操作。倒置顯微鏡操作過程基本與雙筒的正置顯微鏡相似，需注意以下幾點(diǎn)：觀察時(shí)可調(diào)節(jié)鉸鏈?zhǔn)诫p目目鏡至舒適的位置。組織培養(yǎng)液或水濺到載物臺(tái)上、物鏡上或顯微鏡鏡架上可能會(huì)損傷設(shè)備。如果濺上后，應(yīng)該立即從墻上插座拔下電源線，擦去濺出液或水。一定要輕柔轉(zhuǎn)動(dòng)光強(qiáng)調(diào)節(jié)鈕，不要試圖將旋鈕轉(zhuǎn)過終點(diǎn)位置。使用后一定要先將燈的強(qiáng)度調(diào)至Z小再關(guān)電源。使用后要旋轉(zhuǎn)三孔轉(zhuǎn)換器，使物鏡鏡片置于載物臺(tái)下側(cè)，防止灰塵的沉降。
（三）實(shí)體顯微鏡又稱體視顯微鏡或解剖顯微鏡。操作步驟基本和雙筒正置顯微鏡類似：取用解剖鏡時(shí)，移動(dòng)需用雙手，保持穩(wěn)重。若需連鏡箱搬動(dòng)，應(yīng)將鏡箱鎖好，同時(shí)鏡箱的鑰匙必須拔除。鏡管上若有防塵罩，應(yīng)取下并換上目鏡及眼罩。將樣品置于玻片上或蠟盤中再放到載物盤上待觀察。擰緊螺絲，把鏡體先上升到一定高度，然后鎖緊鏡體。觀察前可先轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡管以適合眼間距。雙眼視度差異可用視覺圈調(diào)節(jié)。對(duì)焦時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)升降螺絲不能太快或強(qiáng)行扭轉(zhuǎn)，謹(jǐn)防損壞齒輪。如需放大觀察，再轉(zhuǎn)動(dòng)倍率盤直到所需放大倍率。物像越大，光線越暗，必須調(diào)好光源選擇好背景物。用畢后，先將載物盤上的東西拿走，松緊螺絲將鏡體放下并鎖緊。取出目鏡并換上防塵罩。將元件全部放回，注意不要與其它鏡互換。用布把鏡身擦干凈，放入鏡箱內(nèi)，鎖緊鏡箱。
二、維護(hù)及保養(yǎng)工作
1、日常維護(hù)保養(yǎng)
（1）防潮光學(xué)鏡片就容易生霉、生霧。機(jī)械零件受潮后，容易生銹。顯微鏡箱內(nèi)應(yīng)放置1～2袋硅膠作干燥劑。
（2）防塵光學(xué)元件表面落入灰塵，不僅影響光線通過，而且經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)放大后，會(huì)生成很大的污斑，影響觀察?；覊m、砂粒落入機(jī)械部分，還會(huì)增加磨損，引起運(yùn)動(dòng)受阻，危害同樣很大。注意保持顯微鏡的清潔。
（3）防腐蝕顯微鏡不能和具有腐蝕性的化學(xué)試劑放在一起。如硫酸、鹽酸、強(qiáng)堿等。
（4）防熱避免熱脹冷縮引起鏡片的開膠與脫落。因此，生物顯微鏡要放置在干燥陰涼、無塵、無腐蝕的地方。使用后，要立即擦拭干凈，用防塵透氣罩罩好或放在箱子內(nèi)。當(dāng)顯微鏡閑置時(shí)，用塑料罩蓋好，并儲(chǔ)放在干燥的地方防塵防霉。將物鏡和目鏡保存在干燥器之類的容器中，并防些干燥劑。
2、機(jī)械系統(tǒng)的維護(hù)保養(yǎng)滑動(dòng)部位：定期涂些中性潤(rùn)滑脂油漆和塑料表面的清潔：頑固的污跡可以使用軟性的清潔劑來清洗，建議使用硅布。塑料部分：用軟布蘸水就可以清洗了。注意：不要使用有機(jī)溶劑（如酒精，稀釋劑等）。因?yàn)闀?huì)腐蝕機(jī)械和油漆，造成損壞。
3、光學(xué)系統(tǒng)的維護(hù)保養(yǎng)透鏡的清潔使用后用干凈柔軟的綢布輕輕擦拭目鏡和物鏡鏡片。聚光鏡和反光鏡只要擦干凈就可以了。有較頑固的污跡，可用長(zhǎng)纖維脫脂棉或干凈的細(xì)棉布蘸少些二甲笨或鏡頭清洗液擦拭，然后用干凈細(xì)軟的綢布擦干或用吹風(fēng)球吹干。
注意：清洗液千萬不能滲入到物鏡鏡片內(nèi)部，否則會(huì)損壞物鏡鏡片。純酒精和二甲苯容易燃燒，在將電源開關(guān)打開或關(guān)閉時(shí)要特別當(dāng)心不要引燃這些液體。物鏡和目鏡的生霉生霧的處理辦法準(zhǔn)備30%無水乙醇+70%，將不同鏡頭單獨(dú)分開放置干燥劑器皿中，用棉花棒，紗布，柔軟的刷子等比較柔軟的東西來擦拭油鏡當(dāng)時(shí)就要清洗。特別是100X的油鏡，處理不當(dāng)?shù)脑?，前片容易浸油或開膠。目鏡可以自己拆下來清洗，16X目鏡注意別裝反了，前片凹面在上。物鏡不要隨便拆下。注意：擦洗鏡頭時(shí)，不能過用力，以防止損傷鍍膜層。一般2個(gè)月能集中保養(yǎng)一次。顯微鏡多時(shí)，各個(gè)鏡頭要標(biāo)號(hào)以免弄錯(cuò)了搭配。
4、定期檢查為了保持性能的穩(wěn)定，建議做定期的檢查，保養(yǎng)。
綜上所述，對(duì)于生物顯微鏡的維護(hù)保養(yǎng)，主要做到防塵、防潮、防熱、防腐蝕。用后及時(shí)清洗擦拭干凈，并定期在有關(guān)部位加注中性潤(rùn)滑油脂。對(duì)于一些結(jié)構(gòu)復(fù)雜，裝配精密的零部件，如果沒有一定的專業(yè)知識(shí)，一定的技能和工具，就不能擅自拆裝，以免損壞零部件。
